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天津本生-如何科學正確地使用凍存管呢?
更新時間:2021-10-14瀏覽:2154次

  天津本生-如何科學正確地使用凍存管呢?


  凍存管的使用是一門學問,并不是打開液氮罐、放入凍存管、關上液氮罐這樣簡單的三部曲可以完成的。科學正確地使用凍存管,可以避免樣本的損失,并保護試驗人員的安全。下面便是天津本生小編的詳解,不放來看看。

螺旋蓋管.png


  凍存管:冷凍步驟

  用預熱的PBS溶液洗滌細胞,吸取溶液,含有胰蛋白酶和EDTA的溶液覆蓋細胞(薄薄的液層足夠,胰蛋白酶和EDTA的濃度需要根據細胞系確定)。

  37℃孵育細胞3-5分鐘。

  細胞從底部脫離之后,終止孵育,加入含有血清的培養基,用移液器輕輕地懸浮細胞。

  離心細胞懸液(500 x g, 5分鐘),用含有血清的培養基重新懸浮。

  細胞計數。

  離心細胞懸液(500 x g, 5分鐘),去除上清液,用適量體積的含有血清的培養基重新懸浮細胞。

  以1:1體積比混合細胞和凍存液(60%培養基,20%胎牛血清,20% DMSO),然后轉移到Cryo.sTM凍存管中。凍存的細胞密度為 1-5×106  個/毫升。

  含有細胞的Cryo.sTM凍存管建議以?1 K / min  的速率降溫,可以將凍存管置于?70℃含有異丙醇的容器中。如果Cryo.sTM凍存管存儲其他樣品,可以直接放置在?20℃,?70℃或者液氮的氣相。為了確保樣品冷凍均勻,4  mL和5 mL的Cryo.sTM凍存管需要先置于在?20℃冰箱過夜,然后再轉移到?70℃或者液氮的氣相。

  然后轉移Cryo.sTM凍存管到液氮罐。為了避免污染(如支原體)和安全考慮,請將Cryo.sTM凍存管置于液氮的氣相,切勿置于液相。

  如何科學正確地使用凍存管?我司由具有行業背景和豐富市場經驗的業人士組成,于為生命科學研究域提供產品,為廣大科研工作者提供服務。  既能滿足研發類客戶對產品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產型企業從小試、中試到規模化生產各個階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。


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